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molecularinstruments雜交鏈反應

 更新時間:2020-09-24 點擊量:2797

 

molecularinstruments雜交鏈反應(HCR)

HCR放大器可在多種技術環(huán)境中實現(xiàn)多路,定量,1步,等溫,無酶信號放大。

 

HCR機制

在2004年,HCR引入了條件核酸自組裝的概念,證明了可以對核酸分子進行改造,使其在混合時不相互作用,而是僅在暴露于同源引發(fā)劑序列時才進行自組裝。 一個HCR放大器由兩個動態(tài)捕獲的發(fā)夾h1和h2組成,它們在實驗室時間尺度上穩(wěn)定地共存。發(fā)夾h1和h2儲存能量,以在暴露于HCR引發(fā)劑i1時驅動有條件的自組裝級聯(lián)反應。 引發(fā)劑i1觸發(fā)交替的h1和h2聚合步驟的鏈反應,導致熒光HCR擴增聚合物的生長。

HCR多路復用

HCR放大器是可編程的,可使用編程為獨立運行的正交放大器實現(xiàn)直接的多路復用。該凝膠展示了通過4個正交HCR放大器(B1,B2,B3,B4)進行的多路信號放大。在沒有引發(fā)劑的情況下,發(fā)夾在其亞穩(wěn)狀態(tài)下表現(xiàn)出小的泄漏。將任何單個啟動器(B1i1,B2i1,B3i1,B4i1)引入放大器混合物中都會觸發(fā)相應的放大器。 

HCR定量

HCR機制簡單而強大,無需使用酶即可提供定量,高增益,1步信號放大。HCR信號放大可實現(xiàn)四種定量分析模式: 

qHCR成像

在解剖學背景下具有亞細胞分辨率的模擬RNA相對定量(例如,整裝脊椎動物胚胎)。

?

dHCR成像

在解剖學背景下(例如厚腦片)以單分子分辨率進行數(shù)字RNA定量。

正交HCR放大器

qHCR流式細胞儀

模擬RNA相對定量用于哺乳動物和細菌細胞的高通量表達譜分析。

?

qHCR Northern印跡

同時定量RNA靶的大小和豐度。